上海申安手提式滅菌鍋在米曲霉固態(tài)發(fā)酵豆粕制備大豆肽的研究中的應(yīng)用

豆粕：山東萬(wàn)得福集團(tuán)生產(chǎn)。

1.1.2 培養(yǎng)基

斜面培養(yǎng)基：米曲霉A-9005 查氏培養(yǎng)基[3]；液體活化培養(yǎng)基：米曲霉A-9005 查氏培養(yǎng)基[3];

發(fā)酵培養(yǎng)基及其發(fā)酵：水質(zhì)量分?jǐn)?shù)65%，豆粕與麩皮按設(shè)計(jì)比例配制，pH 值5.4~7.0， 取28 g 分裝于250 mL 三角瓶中，121 ℃，20 min 滅菌， 待用。

按10%冷卻接種，于不同溫度下進(jìn)行發(fā)酵。

1.1.3 試劑

濃硫酸，雙氧水，五水硫酸銅，硫酸鉀，硒粉，硼酸，溴甲酚綠，甲基紅，鹽酸，氫氧化鈉，以上試劑均為分析純。

1.1.4 儀器設(shè)備

上海天平儀器廠FA2004 分析天平； 東聯(lián)電子HZQ-Q 振蕩器；北京醫(yī)用LG10-2.4 高速離心機(jī)；蘇州凈化SW-CJ-2G 型雙人凈化工作臺(tái)； 上海申安DSX-280AI 型不銹鋼手提式滅菌鍋；FOSS 分析公司全自動(dòng)凱氏定氮儀； 上海精宏MJPS-150 型霉菌培養(yǎng)箱。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 工藝流程

原料（主要為豆粕）→固態(tài)發(fā)酵→三氯乙酸提

取→大豆肽提取液。

將接菌后的發(fā)酵培養(yǎng)基放入相對(duì)濕度90%霉菌培養(yǎng)箱，在不同溫度下培養(yǎng)。

取一定量豆粕，按不同比例加入麩皮，調(diào)pH 值**5.4～7.0，發(fā)酵料坯含水率調(diào)節(jié)**65％。經(jīng)滅菌、冷卻，用米曲霉A-9005 接種，選擇不同的發(fā)酵溫度，

發(fā)酵過(guò)程和結(jié)束后測(cè)定發(fā)酵豆粕中酸溶蛋白含量。

1.2.2 提取及計(jì)算方法

稱取5 g 樣品（精確**0.0001 g）， 加入5 mL10%三氯乙酸溶液，混合均勻，再加入10 mL 5%三氯乙酸溶液， 靜置沉降5 min 后轉(zhuǎn)到離心管中，在4000 r/min 下離心10 min， 取上清液并轉(zhuǎn)到25 mL比色管中定容[4]。